PCR实验室又称为基因扩增实验室,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段,可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统,能迅速掌握患者体内的病毒含量,其精确度高达纳米级别,精确检测乙肝病毒在患者体内存在的数量、是否复制、是否传染、传染性有多强、是否必要服药、肝功能有否异常改变能及时判断病人最适合使用哪类抗病毒药物、判断药物疗效如何、给临床治疗提供了可靠的检验依据。
一、PCR实验室基本结构
PCR实验室基本由四大结构组成,常见为:试剂准备区、制备区、扩增区和扩增分析区。
二、基本功能介绍:
1、准备区:主要进行实验所需试剂的准备工作,分装等,由传递窗运送至制备区,严禁走人员通道。
2、制备区:主要进行样品等保存,DNA/RNA的提取、贮存和其加入至扩增反应管和测定DNA/RNA的合成。
3、扩增区:主要进行DNA的扩增,已制备的DNA模版和合成的cDNA的加入和主板反应混合液制备成反应混合液等也可在扩增区内进行,在巢式PCR测定中,通常在首次扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高等污染危害性,二次加样必须在本区完成。
4、扩增分析:主要用来做扩增产物的测定,本区是主要的扩增产物污染来源,因此必须主意避免通过本区的物品或者工作服将扩增产物带出。
三、以上四个功能区顺序为:准备➡️制备➡️扩增➡️分析,为了避免交叉污染,实验区设计全排风、全新风系统要求,保持阶梯性压差(有正压至负压)。实现工艺、物品、人员、气压气流单向流程保护。
四、PCR实验室区域选择建设材料:
墙面应选择结构牢固,气密性好,无**角,墙体易清洁易消毒,不积尘,耐腐蚀等特点。地面应选择pvc卷材或环氧树脂自流平耐腐蚀,易清洁材料。
五、试验区仪器设备基本配置:
1、准备区:超净台、天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。
2、制备区:冰箱(-80)生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。
3、扩增:扩增仪、冰箱、离心机、加样器等。
4、扩增分析区:酶标仪、洗板机、加样器、水浴箱等。
5、实验台、试剂柜等配套设施:满足耐腐蚀、抗细菌、洁净等要求(一般常见材质为全钢或不锈钢)。
六、PCR实验室没有太严格的等级洁净度要求,可根据多方面因素全面考虑。